
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的平滑肌细胞专用培养基是针对人、大鼠、小鼠等来源的原代平滑肌细胞(如血管平滑肌细胞、气道平滑肌细胞、膀胱平滑肌细胞等)优化配制的完全培养基。本产品以 DMEM/F-12 为基础,添加优质胎牛血清、平滑肌细胞生长添加剂(SMCGS,含 PDGF-BB、bFGF、EGF 等)、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠及双抗,可有效维持平滑肌细胞的典型“峰-谷”形态及收缩表型标志物(如 α-SMA、SM22α、Calponin)表达,促进细胞增殖并延缓去分化。适用于心血管疾病研究、血管重塑、气道高反应性等实验。
【产品特点】
1. 即用型完全配方:含 SMCGS、血清及双抗,无需额外添加,开瓶即用;
2. 维持平滑肌表型:优化生长因子组合,抑制去分化,保持收缩表型;
3. 无菌保障:0.22 μm 过滤除菌,无细菌、真菌及支原体污染;
4. 适用广泛:适用于大鼠、小鼠、人等来源的血管、气道、消化道平滑肌细胞。
【储存条件】
1. 保存:2-8℃ 避光保存,有效期 3 个月。请勿冷冻,冷冻会导致生长因子失活及蛋白沉淀;
2. 运输:冰袋或蓝冰运输,收货后立即 2-8℃ 存放;
3. 使用前:若出现微量絮状沉淀,可 37℃ 水浴轻摇溶解后使用。
【产品组成】
本品为含 DMEM/F-12 基础培养基、10% 优质胎牛血清、1% 平滑肌细胞生长添加剂(SMCGS)、2 mM L-谷氨酰胺、1 mM 丙酮酸钠及 1% 青链霉素混合液(100×)的无菌液体培养基,含酚红指示剂。
【使用说明】
一、使用前准备
1. 从 2-8℃ 取出培养基,检查溶液是否澄清、颜色为红色(pH 7.2-7.4);
2. 使用前将培养基置于 37℃ 水浴中预热至 37℃;
3. 培养器皿推荐用 0.1% 明胶或纤连蛋白包被(37℃,30 min),以提高平滑肌细胞贴壁率。
二、原代平滑肌细胞培养
1. 分离得到的原代平滑肌细胞,用专用培养基重悬后接种至包被过的培养器皿;
2. 置于 37℃、5% CO₂ 培养箱培养,48 小时内尽量不移动,以利贴壁;
3. 每 2-3 天更换新鲜培养基。
三、传代操作
1. 细胞密度达 80%-90% 时,弃去旧培养基,PBS 洗涤 1-2 次;
2. 加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA(或更温和的 TrypLE),37℃ 消化 1-3 分钟(显微镜下观察细胞变圆、开始脱落);
3. 加入等体积专用培养基(含血清)终止消化,轻轻吹打制成单细胞悬液;
4. 按 1:2 至 1:3 比例接种至新培养瓶,补足专用培养基;
5. 置于 37℃、5% CO₂ 培养箱培养,每 2-3 天换液。
四、形态观察
- 正常平滑肌细胞呈长梭形,生长致密时形成典型的“峰-谷”状多层生长(区别于成纤维细胞的束状排列)。若细胞变宽大、出现扁平或合成表型(缺乏 α-SMA 表达),表明已去分化,建议使用低代次细胞(P3-P6)。
【注意事项】
1. 仅限科研使用,不得用于临床诊断、治疗、食品或化妆品;
2. 严格无菌操作,避免污染;
3. 若培养基变黄(pH < 6.0)或出现浑浊、大量沉淀,请勿使用;
4. 含酚红,对光敏感实验建议选用不含酚红版本;
5. 平滑肌细胞对胰酶敏感,消化时间不宜过长,否则影响细胞活性及表型;
6. 使用后剩余培养基立即盖紧瓶盖,返回 2-8℃ 保存;
7. 废液及接触过的耗材按生物废弃物处理。