
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的蛋白酶K是一种高活性的丝氨酸蛋白酶,来源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album),具有稳定的理化性质。其活性位点包含催化三联体(Asp39-His69-Ser224),能广泛切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。
本品在较宽的pH范围(4.0–12.5)及高温(50–70℃)条件下均具有活性,且酶活不会被尿素、SDS和EDTA等变性剂抑制。蛋白酶K是核酸提取的关键试剂,可在不损害DNA完整性的前提下,消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶,广泛应用于质粒或基因组DNA/RNA的分离、石蜡包埋组织切片的抗原修复以及朊病毒脑组织样本的蛋白消化等研究。
【产品参数】
项目 | 规格 |
英文名称 | Proteinase K |
CAS号 | 39450-01-6 |
分子量 | 29 kDa |
外观 | 白色粉末至类白色粉末 |
级别 | BR |
含量 | ≥99% |
酶活/效价 | ≥30 U/mg |
溶解性 | 10 mg/mL in water(推荐浓度) |
储存条件 | 2-8℃,有效期 2 年 |
运输条件 | 冷藏运输 |
【产品特点】
1. 高稳定性:在尿素、SDS、EDTA等变性剂及较宽的pH(4.0–12.5)和温度范围内均能保持高活性。
2. 无核酸酶污染:经纯化去除DNase和RNase活性,适用于核酸提取等对酶纯度要求高的实验。
3. 反应条件宽泛:在0.1–0.5% SDS存在下仍保持活性,兼容DNA/RNA提取缓冲液体系。
4. 应用广泛:适用于基因组DNA/RNA分离、线粒体分离、组织切片处理及朊病毒研究等多种分子生物学实验。
【储存条件】
- 保存:2–8℃ 干燥、密封保存,有效期 2 年。
- 运输:冷藏运输,收货后立即 2–8℃ 存放。
- 储存液:溶解后建议分装为适当体积,于 -20℃ 冻存,避免反复冻融导致酶活下降。
【产品组成】
本品为蛋白酶K冻干粉末,100 mg/瓶。
【使用说明】(仅供参考)
一、储存液配制
1. 溶解:推荐使用无菌去离子水或PBS将粉末溶解至 10 mg/mL 的母液浓度。
2. 分装:按单次实验用量分装,于 -20℃ 保存,避免反复冻融。
二、推荐反应条件
- 工作浓度:一般建议 0.05–1 mg/mL,具体浓度需根据样本类型及缓冲体系(SDS、尿素浓度等)进行优化。
- 反应温度:推荐 50–55℃。虽然酶的最适温度约为65℃,但在65℃或更高温度下酶自身会迅速降解,因此50–55℃是兼顾酶活与稳定性的常用选择。
- 反应时间:15分钟至数小时不等,通常 2小时 左右可达到较好消化效果。
三、失活方法
- 在 100℃ 加热 20 分钟,或使用 PMSF(苯甲基磺酰氟)等丝氨酸蛋白酶抑制剂,即可使蛋白酶K失活。
【注意事项】
1. 仅限科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或化妆品。
2. 操作时请穿戴实验服、口罩及一次性手套,避免吸入粉末或直接接触皮肤。
3. 溶解后的酶液反复冻融会显著降低酶活,务必分装后于-20℃保存。