产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的 2× SYBR Green qPCR Mix 是专为实时荧光定量 PCR 设计的即用型预混液，包含热启动 Taq DNA 聚合酶、SYBR Green I 荧光染料、dNTPs、Mg²⁺ 及优化缓冲液。适用于高通量基因表达分析、miRNA 检测及 DNA 定量。
【产品组成】
本品为 2× 浓度预混液，含：
- 热启动 Taq DNA 聚合酶
- SYBR Green I 荧光染料
- dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)
- MgCl₂ (优化终浓度 3-5 mM)
- 反应缓冲液 (含稳定剂及增强剂)
【产品特点】
1. 高灵敏度：可检测低至 1-10 拷贝的靶基因。
2. 高特异性：热启动酶与专利增强剂减少引物二聚体及非特异性扩增。
3. 快速便捷：仅需加入引物、模板和去离子水即可上机。
4. 宽动态范围：可达 9 个数量级，标准曲线 R² > 0.99。
5. 兼容性广：适配 ABI、Bio-Rad、Roche、Qiagen 等主流 qPCR 仪器。
6. 稳定性好：反复冻融不影响性能（建议分装保存）。
【储存条件】
1. 长期储存：-20℃ 避光保存，避免反复冻融。
2. 短期使用：2-8℃ 避光可保存 1 个月。
3. 运输：冰袋或干冰运输，收货后立即 -20℃ 存放。
【有效期】
未开封-20℃ 避光保存，自生产日期起 12 个月。（生产批号及有效期见外包装标签）
【使用说明】
1. 反应体系配制（建议冰上操作）
组分 | 体积 (μL) | 终浓度 |
2× SYBR Mix | 10 | 1× |
上游引物 (10 μM) | 0.4-1.0 | 0.2-0.5 μM |
下游引物 (10 μM) | 0.4-1.0 | 0.2-0.5 μM |
模板 DNA/cDNA | 1-2 | 适量 |
无菌去离子水 | 补至 20 | - |
> 推荐反应体积 20 μL，可按比例放大至 50 μL。
2. PCR 程序（两步法或三步法）
两步法：
- 95℃ 预变性 2-5 min
- 95℃ 变性 10-15 sec
- 60℃ 退火/延伸 30-60 sec（采集荧光）
- 循环数：40
三步法（如需要）：
- 95℃ 预变性 2-5 min
- 95℃ 变性 15 sec
- 55-65℃ 退火 20 sec
- 72℃ 延伸 20-30 sec（采集荧光）
- 循环数：40
熔解曲线分析：仪器默认程序（如 95℃ 15 sec，60℃ 60 sec，然后缓慢升温至 95℃ 采集荧光）。
3. 结果分析
- 使用仪器自带软件分析 Ct 值及熔解曲线。单峰表示扩增特异性良好。
【注意事项】
1. 仅用于科研，不得用于临床诊断。
2. SYBR Green I 对强光敏感，操作及储存需避光。
3. 使用前充分解冻并颠倒混匀（请勿涡旋剧烈振荡）。
4. 所有组分应使用无核酸酶耗材及试剂。
5. 设置无模板对照（NTC）和无反转录对照（NRC）评估污染。
6. 不同仪器可能需要调整退火温度或采集步骤，请参考仪器说明。
7. 如需分装，避免反复冻融，建议 -20℃ 分装保存。