
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的 NIH/3T3 细胞专用培养基是针对小鼠胚胎成纤维细胞系 NIH/3T3 优化配制的完全培养基。NIH/3T3 细胞对培养条件要求较高,本产品以 DMEM(高糖)为基础,添加优质新生牛血清或胎牛血清(根据细胞系特性优化)、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠及非必需氨基酸,可有效维持细胞典型的成纤维细胞形态(长梭形,接触抑制敏感),支持细胞快速增殖并保持其对接触抑制的敏感性,适用于转染、病毒包装、共培养等实验。
【产品特点】
1. 即用型完全配方:含血清、双抗及全部添加物,无需额外配制;
2. 维持细胞特性:优化营养比例,支持 NIH/3T3 细胞长期传代,保持接触抑制及形态均一性;
3. 无菌保障:0.22 μm 过滤除菌,无细菌、真菌及支原体污染;
4. 适用广泛:适用于 NIH/3T3、3T3-L1、3T3-Swiss 等相关细胞系的培养。
【储存条件】
1. 保存:2-8℃ 避光保存,有效期 3 个月。请勿冷冻,冷冻会导致血清蛋白沉淀及营养降解;
2. 运输:冰袋或蓝冰运输,收货后立即 2-8℃ 存放;
3. 使用前:若出现微量絮状沉淀,可 37℃ 水浴轻摇溶解后使用,不影响效果。
【产品组成】
本品为含 DMEM(高糖)基础培养基、10% 优质新生牛血清(或胎牛血清,以标签为准)、2 mM L-谷氨酰胺、1 mM 丙酮酸钠、1% 非必需氨基酸(NEAA)及 1% 青链霉素混合液(100×)的无菌液体培养基,含酚红指示剂。
【使用说明】
一、使用前准备
1. 从 2-8℃ 取出培养基,检查溶液是否澄清、颜色为红色(pH 7.2-7.4);
2. 使用前将培养基置于 37℃ 水浴中预热至 37℃。
二、细胞传代操作
1. 当 NIH/3T3 细胞密度达到 80%-90% 时,弃去培养上清;
2. 用无菌 PBS 洗涤细胞层 1-2 次;
3. 加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液(覆盖细胞层),37℃ 消化 1-2 分钟(显微镜下观察细胞变圆、间隙增大);
4. 加入等体积专用培养基(含血清)终止消化,轻轻吹打制成单细胞悬液;
5. 按 1:3 至 1:5 的比例接种至新培养瓶,补充专用培养基至正常体积;
6. 置于 37℃、5% CO₂ 饱和湿度培养箱中培养,每 2-3 天更换一次培养基。
三、形态观察
- 正常 NIH/3T3 细胞呈长梭形、成纤维细胞样,生长至融合时呈单层排列,并表现出接触抑制(不会多层堆积)。若细胞出现宽大扁平、胞质空泡或失去接触抑制,表明细胞状态不佳,建议复苏低代次细胞。
【注意事项】
1. 仅限科研使用,不得用于临床诊断、治疗、食品或化妆品;
2. 操作时严格无菌,避免污染;
3. 若培养基变黄(pH < 6.0)或出现浑浊、大量沉淀,请勿使用;
4. 含酚红,对光敏感实验建议选用不含酚红版本;
5. NIH/3T3 细胞对消化敏感,消化时间不宜过长,否则会损伤细胞膜受体;
6. 细胞密度不宜过高(>90%),否则会影响接触抑制特性及后续实验(如转染效率);
7. 使用后剩余培养基立即盖紧瓶盖,返回 2-8℃ 保存;
8. 废液及接触过的耗材按生物废弃物处理。