产品详情
【产品简介】
Augene Tech 小鼠 CD45+ 细胞分选试剂盒基于免疫磁珠阳性选择原理，从脾脏、淋巴结、肺组织等来源的单细胞悬液中快速分离高纯度 CD45+ 白细胞。试剂盒采用生物素化抗小鼠 CD45 抗体与链霉亲和素包被的超顺磁珠，在磁场中高效捕获靶细胞。无需分选柱，60 分钟内即可完成，所得细胞纯度 ≥90%，活性完好，适用于流式细胞术、细胞培养、RNA 提取及功能学研究。
【产品特点】
1. 高纯度：流式验证纯度 ≥90%，背景细胞去除彻底
2. 高活性：温和的磁珠标记及分离条件，细胞活力无显著下降
3. 操作便捷：无需分选柱、无需离心，单次磁分离即可完成
4. 灵活处理：1 Test 处理 1×10⁷ 细胞，可线性放大至 1×10⁹
5. 兼容性强：分选后细胞可直接用于流式、培养、分子生物学实验
【储存条件】
- 所有组分：2–8℃ 避光保存，严禁冷冻（冷冻破坏磁珠结构及抗体活性）
- 有效期：自生产之日起 12 个月*
- 运输：冰袋或 2–8℃ 运输，收货后立即按条件存放
- 使用前：平衡至室温，分选缓冲液需 4℃ 预冷
【产品组成】
小鼠CD45+分选抗体混合物（生物素化）1 mL、分选磁珠（链霉亲和素标记）2×1 mL及5×浓缩分选缓冲液100 mL
【使用说明】
一、试剂准备
- 将 5× 分选缓冲液用无菌去离子水稀释成 1× 工作液，4℃ 预冷。
- 抗体混合物和磁珠使用前轻弹混匀（请勿涡旋）。
二、单细胞悬液制备
1. 从小鼠脾脏、淋巴结等组织制备单细胞悬液，经 70 μm 细胞筛过滤。
2. 300×g 离心 5 分钟，弃上清。
3. 用 1× 分选缓冲液 重悬细胞，调整终浓度至 1×10⁸ cells/mL。
三、细胞标记与分选（以 1×10⁷ 细胞为例）
1. 取 100 μL 细胞悬液（1×10⁷ cells）至 5 mL 圆底聚丙烯管。
2. 加入 10 μL 抗体混合物，轻混，室温孵育 5 分钟。
3. 加入 10 μL 磁珠，轻混，室温孵育 5 分钟。
4. 用 1× 分选缓冲液补至 2.5 mL，轻柔颠倒混匀。
5. 将试管放入磁极（推荐 EasySep™、MagniSort™ 或等效型号），室温静置 5 分钟。
6. 保持试管在磁极中，倾倒或吸走上清（含非 CD45+ 细胞），保留管底磁珠 细胞复合物。
7. 取出试管，加入 2.5 mL 1× 分选缓冲液重悬，再次放入磁极静置 5 分钟，弃上清。
8. 最终沉淀为 CD45+ 富集细胞，用适当体积的缓冲液或培养基重悬后使用。
四、下游应用示例
- 流式细胞术：取少量细胞用荧光标记的抗 CD45 抗体染色，评估纯度。
- 细胞培养：重悬于含 10% FBS 的 RPMI-1640 或 DMEM 中培养。
- 提取：直接加入 TRIzol 或裂解液进行提取。
- 功能实验：可用于混合淋巴细胞反应（MLR）、细胞因子分泌检测等。
【注意事项】
1. 仅限科研使用，不得用于临床诊断或治疗。
2. 所有组分严禁冷冻。分选缓冲液稀释后可 4℃ 保存备用。
3. 磁极应远离心脏起搏器、信用卡、硬盘等易受磁场影响的物品。
4. 操作全程保持无菌，避免细胞污染。
5. 单次分选细胞数可低至 1×10⁶，高至 1×10⁸；若超过 1×10⁸，需按比例放大所有试剂体积并适当延长孵育时间。
6. 若磁珠出现轻微团聚，可在 2–8℃ 静置或轻摇分散，不可超声；严重结块则停止使用。
7. 不同批次的抗体和磁珠不可混用，以免影响分选效果。
8. 如产品出现沉淀、浑浊或变色，请勿使用。