
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 红细胞裂解液(无菌)是一种即用型、不含固定剂的裂解试剂,利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理,选择性裂解无核红细胞。本产品适用于从动物全血、骨髓、脾脏等组织单细胞悬液中快速去除红细胞,同时最大程度保留有核细胞的完整性和活性,不损伤白细胞、淋巴细胞等靶细胞。注意:本产品不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。
本产品经无菌处理,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化、淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除,适用于流式细胞术、细胞培养、核酸提取等下游实验。
【产品特点】
1. 温和高效:快速裂解红细胞,对白细胞等有核细胞无损伤;
2. 无菌即用:无菌过滤,无需配制,直接使用;
3. 适用广泛:适用于小鼠、大鼠、人、兔等哺乳动物全血及组织样本;
4. 不影响下游实验:裂解后细胞活性高,可直接用于流式、细胞培养、RNA 提取等;
5. 无固定剂:不含甲醛等固定成分,保持细胞膜完整性及抗原表位。
【储存条件】
- 保存:2-8℃ 避光保存,有效期 2 年。
- 运输:常温运输。
- 注意事项:若低温出现沉淀,可 37℃ 水浴溶解后使用。
【产品组成】
本品为含氯化铵、碳酸氢钾、EDTA 二钠等的无菌水溶液,pH 7.2-7.4,不含防腐剂和固定剂。
【使用说明】
一、新鲜血液样本处理
1. 取新鲜抗凝全血(EDTA、肝素或枸橼酸钠抗凝均可),按 1 倍体积全血加入 3 倍体积的红细胞裂解液的比例混合(如 1 mL 全血加入 3 mL 裂解液),轻轻涡旋或颠倒混匀。
2. 冰上放置 15 分钟,其间轻轻涡旋混匀两次。红细胞裂解后,溶液应呈清亮透明。
3. 收集细胞:4℃,450×g 离心 10 分钟沉淀白细胞,小心吸弃上清液。
4. 向白细胞沉淀中加入 2 倍体积的红细胞裂解液(如起始血液为 1 mL,则加入 2 mL 裂解液),轻轻涡旋充分重悬白细胞。
5. 4℃,450×g 离心 10 分钟沉淀白细胞,小心并彻底吸去上清液。
6. 重悬细胞,用于后续实验。如提取 RNA,建议自此步骤开始使用 DEPC 处理水或无酶水配制的溶液进行操作。
二、骨髓或脾脏单细胞悬液处理
1. 新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液。
2. 加入 2-3 倍细胞沉淀体积的红细胞裂解液,轻轻重悬。
3. 冰上放置 10-15 分钟,期间轻摇 1-2 次。
4. 4℃,450×g 离心 10 分钟,弃上清。
5. 如需进一步去除残留红细胞,可重复步骤 2-4 一次。
6. 用培养基或适当缓冲液重悬后计数,进行下游实验。
【注意事项】
1. 仅限科研使用,不得用于临床诊断、治疗、食品或化妆品。
2. 本裂解液为无菌产品,分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。
3. 裂解时间不宜过长,过长可能损伤有核细胞。
4. 若样本量较大,可按比例增加裂解液体积,保证充分裂解。
5. 裂解后细胞应尽快进行后续处理(如染色或培养),不宜长时间存放。
6. 本产品不适用于有细胞核红细胞的裂解(如鸟类、禽类红细胞)。
7. 如产品出现浑浊、沉淀或污染,请勿使用。