产品详情
【产品简介】
本品为含 0.25% 胰蛋白酶（1:250）和 0.02% EDTA（约 0.53 mM）的平衡盐溶液，不含酚红。用于贴壁细胞（如成纤维细胞、上皮细胞等）的常规消化解离，EDTA 可螯合 Ca²⁺、Mg²⁺，增强胰蛋白酶的酶解活性。无酚红配方可避免对荧光检测、比色分析及部分细胞功能实验的干扰，适用于对试剂颜色敏感的科研应用。
【产品特点】
1.高效消化：0.25% 胰蛋白酶结合 EDTA，有效解离多数贴壁细胞
2.无酚红：排除酚红对荧光、比色及激素相关实验的干扰
3.无菌即用：0.22 μm 过滤除菌，可直接使用
4.适用广泛：适合常规细胞系（如 HeLa、HEK293、CHO、MCF‑7 等）的传代培养
【储存条件】
- 长期保存 ：≤ -20℃ 避光保存，有效期 24 个月
- 短期使用 ：2‑8℃ 可稳定保存 1‑2 周 （建议分装后冻存，避免反复冻融）
- 运输 ：冰袋或蓝冰运输，收货后立即按条件储存
- 分装建议：首次解冻后按单次用量分装（如 5‑10 mL/管），冻存于 -20℃
【产品组成】
组分 | 含量 |
胰蛋白酶（1:250） | 0.25% (w/v) |
EDTA·4Na | 0.02% (w/v) |
氯化钠、氯化钾、磷酸盐等 | 平衡盐溶液 |
酚红 | 无 |
溶剂 | 去离子水 |
pH | 7.2‑7.4 |
> 本产品经 0.22 μm 过滤除菌，不含抗生素或防腐剂。
【使用说明】
（1）试剂准备
- 从 -20℃ 取出后，于 2‑8℃ 或室温解冻，轻摇混匀。
- 预热：使用前将所需体积的胰酶置于 37℃ 水浴中预热 5‑10 分钟。
- 无需稀释，直接使用。
（2）细胞消化步骤（以 T25 培养瓶为例）
1. 吸去或倒掉细胞培养上清。
2. 用无菌 PBS（不含 Ca²⁺/Mg²⁺）洗涤细胞 1‑2 次，以去除残留血清（血清会抑制胰酶活性）。
3. 加入 1‑2 mL 胰蛋白酶‑EDTA 溶液，轻轻摇动使溶液覆盖整个细胞层。
4. 将培养瓶置于 37℃ 培养箱中孵育 1‑5 分钟 （具体时间视细胞类型而定）。
5. 在显微镜下观察：当细胞变圆、边缘明亮、部分细胞开始脱落时，立即加入含血清的完全培养基（体积为胰酶的 2‑5 倍）终止消化。
6. 轻轻吹打细胞层数次，收集细胞悬液，离心后弃上清，重悬备用。
（3）注意事项
- 首次使用建议预实验：不同细胞系对胰酶的敏感度不同（例如 HEK293 消化较快，原代成纤维细胞较慢），请摸索最佳消化时间。
- 切勿过度消化：长时间处理会损伤细胞膜表面蛋白，影响细胞活性和后续实验。
- 无血清消化：若需完全无血清体系，可使用大豆胰蛋白酶抑制剂或等体积 PBS 洗涤终止，再离心收集。
【注意事项】
1. 仅限科研使用，不得用于临床诊断或治疗。
2. 无菌操作：所有操作应在超净工作台中进行，避免污染。
3. 避免反复冻融：反复冻融会降低胰蛋白酶活性，建议分装冻存。
4. 解冻后如有沉淀：可能为少量蛋白析出，可 37℃ 水浴短暂加热并轻摇溶解，不影响使用；若沉淀严重或溶液浑浊，请勿使用。
5. 终止条件：含血清培养基中的血清蛋白可快速抑制胰酶活性；若为无血清培养体系，建议加入等体积 0.1% 大豆胰蛋白酶抑制剂终止。
6. 安全提示：操作时请穿实验服、戴手套和护目镜。如溅到皮肤或眼睛，立即用大量清水冲洗。
7. 废弃处理：使用后的胰酶溶液和细胞废液请按实验室生物废弃物处理规定处置。