
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的蛋白酶K溶液(Proteinase K Solution)为即用型无菌溶液,浓度为 10 mg/mL。本品采用进口蛋白酶K配置,不含DNase,不含RNase,可直接用于各种分子生物学及细胞生物学实验,如基因组DNA抽提、酶的消化去除、原位杂交前处理等,能有效消化各种蛋白质。
蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,可切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。其酶活力 ≥30 U/mg(在37℃、pH 7.5条件下,每分钟水解酪蛋白生成1 μmol酪氨酸所需的酶量定义为1个单位)。
【产品特点】
1. 高纯度、无核酸酶:进口酶配置,不含DNase和RNase,可直接使用,无需额外纯化。
2. 宽pH适用范围:在pH 4.0–12.5范围内均有活性,最佳pH范围为 pH 7.5–8.0。
3. 耐变性剂:在 0.2–1% SDS 或 约10 mM尿素 存在下,酶活性更高。
4. 兼容性好:常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对酶活力影响不大。
5. 即用便捷:10 mg/mL液体剂型,无需自行溶解配制,开盖即用。
【储存条件】
- 保存:-20℃ 避光保存,有效期 1 年。
- 运输:冰袋或干冰运输,收货后立即 -20℃ 存放。
- 注意事项:建议按每次使用量分装保存,避免反复冻融导致酶活力下降。
【产品组成】
本品为蛋白酶K的无菌水溶液,浓度 10 mg/mL,1 mL/管。
【使用说明】(仅供参考)
一、推荐反应条件
- 最佳反应温度:65℃。但在65℃或更高温度下蛋白酶K自身会迅速降解,因此实际实验中常选择 50–55℃ 进行反应。
- 推荐孵育时间:15分钟至48小时,理想孵育时间为2小时。
- 推荐反应缓冲液:50 mM Tris-HCl (pH 7.5),10 mM CaCl₂。
二、常用工作浓度
- 一般工作浓度:0.05–1 mg/mL。具体浓度需根据缓冲液中是否含有SDS、尿素,以及pH和温度等因素进行优化。
- 原位杂交前处理:需注意控制浓度和消化时间。浓度过高或消化时间过长会破坏细胞结构,导致切片脱落或细胞核消失,影响杂交结果。
三、使用注意事项
- 失活条件:在 95℃ 加热10分钟、使用PMSF等蛋白酶抑制剂、或经苯酚/氯仿抽提,均可使其失活。
- 操作:本品为即用型溶液,取用后请立即放回 -20℃。
【注意事项】
1. 仅限科研使用,不得用于临床诊断或治疗。
2. 如果每次使用量很小,建议适当分装后再使用,避免反复冻融。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。