
产品详情
【产品简介】
Augene Tech的灵敏ECL发光试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 (HRP)的抗体、抗原或者核酸。蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上,以HRP标记的抗体或探针结合膜上的目的蛋白或核酸,洗膜后置于用本产品配制的ECL工作液中,室温孵育数分钟。HRP使工作液中的鲁米诺(Luminol)氧化并发光,试剂中添加的增强剂可以使得这种发光大幅度增强。此光经X 光胶片或电子装置感光,可清晰显示蛋白质或核酸条带。
【产品特点】
1.发光性能强:经37℃加速30天检测,发光性能无明显衰减
2.灵敏度高:灵敏型检测下限为中等飞克级
3.稳定性高:适合常规样本的检测,性价比高
【储存条件】
2~8℃保存,有效期12个月
【产品组成】
灵敏ECL工作液A 250mL
灵敏ECL工作液B 250mL
【使用说明】
1.执行常规电泳、转膜、封闭、HRP标记抗体或者HRP标记核酸探针孵育、洗膜;
2.最后一次洗膜的同时,配制新鲜的工作液:分别取等体积的ECL工作液A和ECL工作液B混匀后,室温放置备用;
3.用平头镊取出膜,搭在滤纸上沥干洗液,勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液(100~200μL发光工作液/cm2膜)中,与发光工作液充分接触。室温孵育3~5min,准备立即曝光;
4.用平头镊子夹起膜,用吸水纸接触下边缘去除膜上多余液体,留下少量工作液,不可让膜完全干燥、不可洗去发光液;随后进行压片检测或是荧光成像仪检测。
5.压片检测:在X光胶片暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将印迹膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来完全包裹印迹膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖印迹膜的保鲜膜固定在暗盒内,务必确保蛋白面向上。暗室内取一张X光胶片至于包裹的膜上,压片,分别曝光不同的时间,如数秒到数分钟,随后进行显影、定影。
注意:曝光时间需根据曝光强度做相应的调整。若是背景过高,可使用两张X光胶片同时压片。
6. 荧光成像仪检测:膜直接用于拍照。拍照按仪器使用说明进行。
【注意事项】
1.ECL发光液是HRP的显色底物,因此检测系统最终必须基于HRP酶标记抗体或者核酸探针。
2.取用灵敏型ECL工作液A和灵敏型ECL工作液B一定要使用不同的枪头,否则试剂会缓慢失效。
3.本品仅供科研使用,不可用于临床诊断。
4.如产品出现异常,请勿使用。