产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的高敏型 AGE 检测试剂盒基于竞争抑制酶联免疫吸附分析法定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关生物液体中的晚期糖基化终末产物（AGE）。AGE 是还原糖与蛋白质、脂质或核酸的氨基发生非酶促反应形成的复杂化合物，其积累与糖尿病血管并发症、慢性肾病、阿尔茨海默病、动脉粥样硬化及衰老过程密切相关。
本试剂盒采用竞争法，将 AGE 特异性抗体预包被于微孔板中，样本中的 AGE 与生物素标记的 AGE 抗原竞争结合有限抗体位点。经温育洗涤后，加入 HRP 标记的链霉亲和素，与生物素特异性结合。加入 TMB 底物显色，颜色深浅与样本中 AGE 浓度呈负相关，于 450 nm 波长下测定吸光度，通过标准曲线计算样本浓度。
【产品参数】
检测范围：19.75–1,600 ng/mL
灵敏度：最低检测限 < 7.13 ng/mL
特异性：与其它类似物无明显交叉反应
精密度：批内 CV < 10%，批间 CV < 12%
回收率：血清 95%，EDTA 血浆 90%，肝素血浆 94%
线性范围：样本在 1:2 至 1:16 稀释范围内线性良好
稳定性：2–8℃ 避光保存，活性降低 < 5%
【产品特点】
1. 高灵敏度：最低检测限低至 7.13 ng/mL，适用于低丰度 AGE 样本的检测。
2. 宽检测范围：19.75–1,600 ng/mL，覆盖大多数生物样本的 AGE 浓度区间。
3. 重复性好：批内与批间变异系数分别控制在 10% 与 12% 以内，保障数据可靠性。
4. 样本适用性广：经验证适用于血清、EDTA 血浆及肝素血浆等多种样本类型。
【储存条件】
- 保存：2–8℃ 避光保存，有效期见试剂盒外包装标签。
- 运输：冰袋或蓝冰运输，收货后立即 2–8℃ 存放。
- 注意事项：未使用的板条应密封后 2–8℃ 保存，避免受潮。
【产品组成】
预包被 AGE 抗体微孔板：8 × 12 条
AGE 标准品：2 瓶（冻干粉）
生物素标记 AGE 抗原（检测液 A）：120 μL
HRP 标记链霉亲和素（检测液 B）：120 μL
TMB 底物：9 mL（避光）
终止液：6 mL
30× 浓缩洗涤缓冲液：20 mL
封板膜：2 张
说明书：1 份
(注：以上组分均于 2-8℃ 避光保存，具体规格及数量请以产品实物标签为准。)
【自备材料】
- 酶标仪（含 450 nm 波长，可选配 570 nm 或 630 nm 校正波长）；
- 37℃ 恒温箱；
- 自动洗板机或多道移液器（手工洗板用）；
- 精密单道及多通道移液器（使用前需校准）；
- 无菌 EP 管、一次性吸头、去离子水、吸水纸、加样槽。
【样本采集与处理】
1. 血清
全血室温放置 2 小时或 2–8℃ 过夜，1000×g 离心 20 分钟，取上清。可立即检测或分装冻存于 -20℃ 或 -80℃。
2. 血浆
推荐使用 EDTA 或肝素抗凝。采集后 30 分钟内于 2–8℃ 1000×g 离心 15 分钟，取上清。可立即检测或分装冻存。
3. 组织匀浆
用预冷 PBS 冲洗组织去除残留血液，按 1:9 重量体积比加入 PBS（含蛋白酶抑制剂）匀浆。5000×g 离心 5–10 分钟，取上清检测。
> 样本保存：避免反复冻融。2–8℃ 保存不超过 5 天，-20℃ 不超过 6 个月，-80℃ 不超过 2 年。
【试剂准备】
1. 平衡：实验前 20 分钟从冰箱取出试剂盒，平衡至室温（18–25℃）。
2. 洗涤液：将 30× 浓缩洗涤液用去离子水按 1:30 稀释。
3. 标准品梯度稀释：按标签说明复溶标准品，并用样本稀释液进行倍比稀释，制备标准曲线各浓度点（参考范围 19.75–1,600 ng/mL）。
4. 检测液 A：临用前将生物素标记 AGE 抗原按标签说明稀释配制。
5. 检测液 B：临用前将 HRP 标记链霉亲和素按标签说明稀释配制。
【操作步骤】
1. 加样：设标准孔与样本孔。每孔加入 50 μL 标准品或待测样本，随后加入 50 μL 检测液 A（临用前配制）。覆膜，37℃ 温育 1 小时。
2. 洗板：弃液，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，重复 3 次，拍干。
3. 加检测液 B：每孔加入 100 μL 检测液 B。覆膜，37℃ 温育 30 分钟。
4. 洗板：弃液，洗板 5 次，拍干。
5. 显色：每孔加入 90 μL TMB 底物，37℃ 避光孵育 10–20 分钟。
6. 终止与读数：每孔加入 50 μL 终止液，立即于 450 nm 处读取 OD 值。
【结果计算】
1. 计算标准品与样本复孔的平均 OD450 值，减去空白孔 OD 值作为校正值。
2. 以标准品浓度为横坐标，OD450 值为纵坐标，采用四参数 Logistic（4-PL）曲线拟合绘制标准曲线。
3. 将样本 OD 值代入曲线方程计算浓度。因采用竞争法，样本浓度与 OD 值呈负相关，即 OD 值越低，AGE 浓度越高。若样本经过稀释，结果需乘以相应稀释倍数。
【注意事项】
1. 本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗。
2. 终止液为酸性溶液，操作时请穿戴实验服、手套和护目镜，避免直接接触皮肤。
3. 不同批次试剂严禁混用；加样时更换枪头以防交叉污染；洗板后及时加入下一步试剂，避免板孔干燥导致检测失效。
4. 实验结果受样本状态、操作手法、仪器精度及环境条件等多种因素影响，相关售后处理仅限产品本身，不涉及其他连带赔偿。