
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的 Western 转膜液(10× 浓缩液)是用于蛋白质印迹法(Western Blot)中湿转或半干转膜的标准缓冲液。本产品为 10 倍浓缩液,稀释后使用,含 Tris 、甘氨酸和 SDS(根据需求可选含或不含 SDS,本产品为常规含 SDS 配方,适用于大多数蛋白转膜)。SDS 有助于提高大分子蛋白的转膜效率,尤其适用于分子量 >100 kDa 的蛋白。本配方经典,兼容多种转膜设备,能有效将 SDS-PAGE 凝胶中的蛋白条带转移至 PVDF 或 NC 膜上。
【产品特点】
1. 高浓度浓缩:10× 储存,节省空间,使用前按 1:10 稀释即可;
2. 高效转膜:经典 Tris-甘氨酸-SDS 体系,保证蛋白转移效率高、背景低;
3. 适用广泛:适用于湿转和半干转系统,可配合甲醇或乙醇使用;
4. 稳定性好:室温或 4℃ 长期保存,稀释后建议现配现用;
5. 灵活兼容:可根据蛋白分子量调整 SDS 含量(本品含 SDS,如需不含 SDS 版本可选购其他货号)。
【储存条件】
1. 保存:室温(15-30℃)或 4℃ 避光保存,有效期 24 个月;
2. 运输:常温运输,避免高温和冷冻;
3. 稀释后使用:1× 工作液建议现配现用,4℃ 可短暂存放 1 周。
【产品组成】
本品为 10× 浓缩液,含 Tris 、甘氨酸、SDS,去离子水配制。pH 8.3(1× 工作液)。
【使用说明】
1. 配制 1× 转膜液(以 1 L 为例)
- 取 100 mL 10× 转膜液,加入 700 mL去离子水,混匀。
- 加入200 mL 甲醇(或无水乙醇),充分混匀。
- 4℃ 预冷后使用(甲醇和去离子水可根据实验习惯调整顺序,但最终甲醇浓度建议为 20%)。
> 注意:配制时需先加水稀释 10× 转膜液,再加入甲醇,避免高浓度溶质直接混合产生沉淀。
2. 蛋白转膜操作(湿转为例)
1. 将凝胶、膜、滤纸等浸泡于预冷的 1× 转膜液中 5-10 分钟。
2. 按照“黑色面(负极)- 海绵 - 滤纸 - 凝胶 - 膜 - 滤纸 - 海绵 - 红色面(正极)”顺序组装夹板。
3. 将夹板放入电泳槽,加满 1× 转膜液。
4. 恒流或恒压转膜(常用条件:100 V 或 300 mA,60-120 分钟,具体根据蛋白分子量调整)。
5. 转膜结束后取出膜,进行封闭及抗体孵育。
【注意事项】
1. 仅限科研使用,不得用于临床诊断、治疗、食品或化妆品。
2. 甲醇具有毒性,操作时需在通风橱中进行,穿戴实验服、手套、口罩。
3. 配制好的 1× 转膜液应 4℃ 预冷,防止转膜过程中产热过高。
4. 本品含 SDS,若转印小分子蛋白(<20 kDa)时背景偏高,建议改用不含 SDS 的转膜液。
5. 转膜时间需根据蛋白分子量、凝胶浓度和转膜设备优化,建议预实验确定最佳条件。
6. 如产品出现沉淀或浑浊,可 37℃ 水浴加热并搅拌溶解,若仍无法溶解则请勿使用。