产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的 II 型胶原酶来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种粗酶提取物。胶原酶是唯一一种能够降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶。本品不仅含有能够降解天然胶原和网状纤维的胶原酶（即梭菌蛋白酶A），还含有其他蛋白酶、多糖酶、脂酶等，能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质中的蛋白、多糖和脂质，非常适用于组织消化。
II型胶原酶含有更高的梭菌蛋白酶活性，适用于心脏、骨、肌肉、胸腺、甲状腺、唾液腺、肝脏和软骨等组织来源细胞的制备。本品酶活力 ≥125 U/mg solid。
【产品特点】
1. 高梭菌蛋白酶活性：含有更高的梭菌蛋白酶活性，适用于需要高蛋白酶活性的组织解离；
2. 高效组织解离：能有效解离心脏、骨、肌肉、胸腺、软骨等组织；
3. 高酶活力：酶活力 ≥125 U/mg solid（FALGPA单位）；
4. 组分丰富：含胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶等多种酶组分，协同降解细胞外基质；
5. 适用广泛：适用于肝脏、骨、甲状腺、心脏、唾液腺及多种上皮组织来源细胞的制备。
【储存条件】
- 长期保存：2-8℃ 避光保存，有效期 2 年。
- 储存液保存：过滤除菌后分装，于 -20℃ 避光冻存。
- 运输条件：冰袋或蓝冰运输，收货后立即2-8℃ 存放。
- 注意事项：储存液应分装成单次用量，避免反复冻融。
【产品组成】
本品为来源于溶组织梭菌的 II 型胶原酶冻干粉末，含胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶等多种酶组分。外观为褐色或黑棕色粉末，分子量 68,000–125,000。
【使用说明】
1、储存液配制
（1）推荐使用 TESCA buffer（50 mM TES，0.36 mM 氯化钙，pH 7.4，37℃）配制成 1-2 mg/mL溶液；
（2） 也可使用含钙镁的 PBS、含钙镁的 Hanks 或不含血清的培养基配制；
（3） 轻轻涡旋震荡使其充分溶解（5 mg/mL 可溶于水）；
（4）使用低蛋白结合性的 0.22 μm 滤膜过滤除菌（本品为非无菌包装，若用于细胞培养需过滤除菌）；
（5） 分装成小份量，于 -20℃ 避光冻存；
（6） 使用前于冰上解冻，避免反复冻融。
2、组织分离（参考方案）
（1） 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成 3-4 mm大小的组织块；
（2） 用含钙镁的 HBSS 或 PBS 洗涤组织块数次；
（3）加入足量缓冲液浸没组织块，加入胶原酶至所需工作浓度；
（4） 于 37℃ 孵育 4-18 小时；
- 使用水平摇床可提高消化效率；
- 补充 5 mM Ca²⁺ 可进一步提高消化效率；
（5）分散的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛收集；
（6） 未完全解离的组织可添加新鲜胶原酶工作液继续孵育；
（7） 用不含胶原酶的 HBSS 洗涤收集的细胞数次；
（8） 用细胞培养液重悬细胞，计数后接种培养。
3、推荐工作浓度
- 组织和细胞分散：0.5-2.5 mg/mL
- 软骨消化：1-2 mg/mL
- 肝细胞释放：约 1 mg/mL
- 最佳工作浓度需根据具体实验条件确定。
【注意事项】
1. 仅限科研使用，不得用于临床诊断或治疗。
2. 本品为非无菌包装，若用于细胞培养，需经 0.22 μm 过滤除菌后使用。
3. 去污剂、六氯环己烷和重金属离子可降低酶活性。
4. 最适 pH 值为 6.3-8.8。
5. 储存液应分装冻存，避免反复冻融。
6. 整个操作过程应尽量轻柔，避免用力吹打细胞。
7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。