
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的 Hoechst 33342 染色液(1 mg/mL),适用于细胞凋亡检测、细胞核染色及常规 DNA 染色。Hoechst 33342(也称 bisBenzimide H 33342 或 HOE 33342)是一种可穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞毒性较低。其最大激发波长为 346 nm,最大发射波长为 460 nm;与双链 DNA 结合后,最大激发波长为 350 nm,最大发射波长为 461 nm。本产品浓度为 1 mg/mL,使用前需稀释至工作浓度,可用于固定细胞/组织或活细胞/组织的细胞核染色。
【产品特点】
1.膜通透性:可穿透活细胞膜,对细胞毒性低,适用于活细胞染色;
2.蓝色荧光:与 DNA 结合后发出明亮蓝色荧光,背景低;
3.应用广泛:适用于细胞凋亡检测、细胞核染色及常规 DNA 染色;
4.兼容性好:可与免疫荧光染色及其他荧光染料联合使用;
5.即用型浓缩液:1 mg/mL 浓缩液,稀释后即可使用。
【储存条件】
-保存:-20℃ 避光保存,有效期1 年。
-运输:冰袋运输,收货后立即 -20℃ 存放。
-注意事项:避免反复冻融,建议分装保存。稀释后的工作液建议当天使用。
【产品组成】
本品为 Hoechst 33342 染色液(1 mg/mL),溶于适当溶剂中,1 mL/支。
【使用说明】(仅供参考)
一、Hoechst 33342 染色工作液配制
使用前用生理盐水或 PBS 将 Hoechst 33342 染色液稀释 100 倍,即为工作液(终浓度 10 μg/mL)。
二、固定细胞或组织染色
1.固定与洗涤:细胞或组织样品固定后,适当洗涤去除固定剂。如需进行免疫荧光染色,请先完成免疫荧光染色,再进行 Hoechst 33342 染色。
2.染色:
- 贴壁细胞或组织切片:加入少量 Hoechst 33342 工作液,覆盖住样品即可;
- 悬浮细胞:至少加入待染色样品 3 倍体积的工作液,混匀。
- 室温放置3–5 分钟。
3.洗涤:吸除染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤2–3 次,每次 3–5 分钟。
4.观察:直接在荧光显微镜下观察,或封片后观察。细胞凋亡时,可见凋亡细胞核呈致密浓染或碎块状致密浓染。
三、活细胞或组织染色
1.加液:加入适当量 Hoechst 33342 工作液,充分覆盖待染色样品。通常六孔板每孔加入1 mL 工作液,96 孔板每孔加入100 μL 工作液。
2.孵育:在适宜于细胞培养的温度下培养20–30 分钟。
3.洗涤:弃染色液,用 PBS 或培养液洗涤2–3 次,即可进行荧光检测。
【注意事项】
1.仅限科研使用,不得用于临床诊断或治疗。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,为减缓荧光淬灭可使用抗荧光衰减封片剂。建议染色后尽量当天完成检测,活细胞或组织染色后立即观察。
3. 稀释后的工作液建议当天使用,避免反复冻融。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。