DMEM/F12 培养基,AGCC-10035
产品名称:DMEM/F12(Dulbecco’s Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12)
规格:500 ml
外观:红色透明液体(含酚红)或无酚红液体
储存条件:2–8°C 避光保存,避免冷冻。
有效期:见标签标注。
1. 产品简介
DMEM/F12 是一种广泛用于细胞培养的基础培养基,由 DMEM 和 Ham's F-12 培养基按1:1比例混合优化而成,兼具两者优点:
- DMEM:提供高浓度的葡萄糖、氨基酸和维生素,适合快速增殖细胞。
- F-12:含有更丰富的营养成分(如锌、腐胺、微量元素),适合低密度或原代细胞培养。
应用范围:
✔ 哺乳动物细胞培养(如CHO、HEK293、干细胞、原代细胞)
✔ 细胞转染、病毒包装实验
✔ 类器官培养、3D细胞模型
2. 成分与配方
主要成分(典型配方,具体以实际批号COA为准):
- 无机盐:NaCl、KCl、CaCl₂、MgSO₄ 等(维持渗透压和pH)
- 糖类:葡萄糖(1000–4500 mg/L,具体浓度见产品标签)
- 氨基酸:L-谷氨酰胺、必需及非必需氨基酸
- 维生素:B族维生素、抗坏血酸等
- pH指示剂:酚红(可选无酚红版本)
- 缓冲系统:碳酸氢钠(需在5% CO₂ 环境下平衡pH)
添加剂需求:
- 需补充 10% FBS(胎牛血清)或 1–2% 生长因子(如用于无血清培养)。
- 建议添加 1% 青霉素-链霉素(双抗)以防污染。
3. 使用方法
1. 完全培养基配制(以500 mL为例):
1. 取无菌DMEM/F12基础培养基 445 mL。
2. 加入 50 mL FBS(终浓度10%)和 5 mL 青霉素-链霉素(终浓度1%)。
3. 混匀后4°C保存,建议2周内使用。
2. 细胞培养步骤:
1. 解冻后预温至37°C(避免长时间高温放置)。
2. 按细胞类型调整换液频率(通常每2–3天更换一次)。
3. 培养条件:37°C、5% CO₂、95%湿度。
4. 注意事项
⚠ 无菌操作:开封后避免污染,建议分装使用。
⚠ 谷氨酰胺稳定性:若培养基含L-谷氨酰胺,长期保存可能降解,建议额外补充(2–4 mM)。
⚠ 沉淀问题:低温储存时可能出现盐沉淀,37°C水浴溶解并混匀后使用。
⚠ 无血清培养:需添加胰岛素、转铁蛋白等生长因子。
5. 质量控制
- 渗透压:270–330 mOsm/kg
- pH值:7.2–7.6(平衡后)
- 内毒素:≤0.1 EU/mL