成纤维细胞专用培养基,AGCC-13003
产品背景介绍
成纤维细胞专用培养基是一种经过优化设计的完全培养基,专门用于体外培养各种来源的成纤维细胞。本产品基于经典的DMEM/F12基础培养基配方,添加了适合成纤维细胞生长和增殖的必要营养成分、生长因子和补充剂,能够支持原代和传代成纤维细胞的稳定生长,维持其正常形态和功能特性。
本培养基适用于皮肤、肺、心脏等多种组织的成纤维细胞培养,广泛应用于组织工程、伤口愈合研究、纤维化疾病模型构建以及药物筛选等领域。
产品特点
1. 高效增殖支持:含有优化配比的生长因子组合(包括bFGF、EGF等),显著促进成纤维细胞增殖
2. 长期稳定性:培养基配方稳定,支持细胞连续传代而不易发生表型改变
3. 低血清需求:仅需添加2-5%胎牛血清(FBS)即可获得理想培养效果
4. pH稳定性:优化的缓冲系统确保培养过程中pH值稳定
5. 即用型设计:无需额外添加谷氨酰胺或其他补充剂,开瓶即用
6. 质量保证:经过严格的无菌检测、内毒素检测和细胞培养性能测试
产品组成
- 基础培养基(DMEM/F12)
- L-谷氨酰胺(2mM)
- 非必需氨基酸(1×)
- 丙酮酸钠(1mM)
- HEPES缓冲液(15mM)
- 生长因子补充剂(专有配方)
- 抗生素(可选,50U/mL青霉素和50μg/mL链霉素)
产品使用方法
1. 培养基准备
本产品为即用型液体培养基,使用前需:
- 室温平衡30分钟或4℃过夜解冻
- 根据实验需求添加2-5%胎牛血清(FBS)
- 轻轻摇匀,避免产生气泡
2. 细胞接种
推荐接种密度:
- 原代细胞:5×10⁴ - 1×10⁵ cells/cm²
- 传代细胞:2×10⁴ - 5×10⁴ cells/cm²
3. 培养条件
- 温度:37℃
- CO₂浓度:5%
- 湿度:95%以上
- 换液频率:每2-3天更换一次培养基
4. 细胞传代
当细胞融合度达到80-90%时进行传代:
1. 弃去旧培养基,用PBS洗涤一次
2. 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-3分钟
3. 加入含血清培养基终止消化
4. 离心后重悬,按适当比例接种于新培养器皿
产品使用注意事项
1. 储存条件:
- 未开封培养基:2-8℃避光保存,有效期12个月
- 开封后培养基:2-8℃保存,建议2周内使用完毕
- 避免反复冻融
2. 无菌操作:
- 所有操作应在生物安全柜中进行
- 使用无菌耗材和试剂
- 避免培养基长时间暴露于非无菌环境
3. 质量控制:
- 使用前检查培养基是否澄清,无沉淀或浑浊
- 记录每批培养基的批号和使用情况
- 建议新批次培养基先进行小规模测试
4. 其他注意事项:
- 添加血清后,培养基颜色可能变深,此为正常现象
- 长期培养时建议定期检测细胞支原体污染
- 不同来源的成纤维细胞可能需要调整血清浓度
常见问题解答
Q1: 培养基出现沉淀是否还能使用?
A: 轻微沉淀经37℃水浴溶解后可继续使用。如沉淀不消失或培养基浑浊,建议弃用。
Q2: 细胞生长速度变慢可能是什么原因?
A: 可能原因包括:血清批次差异、培养条件不稳定、细胞传代次数过多或污染。建议更换新鲜培养基和血清,检查培养箱条件。
Q3: 是否可以不加血清使用?
A: 本产品设计为低血清培养基,完全无血清培养可能需要额外添加特定生长因子。建议进行预实验确定最佳条件。
Q4: 培养基可以用于其他类型细胞培养吗?
A: 本产品专为成纤维细胞优化,不建议用于其他类型细胞。不同细胞有各自特异的营养需求。
Q5: 细胞出现异常形态怎么办?
A: 可能原因包括消化过度、培养基pH异常或污染。建议重新接种新鲜培养基,检查培养环境和操作流程。
Q6: 大规模培养时需要注意什么?
A: 大规模培养时需注意:确保培养基均匀分布、增加换液频率、密切监测细胞状态和培养基消耗情况。
产品声明
本产品仅限于科研,如需储存珍贵样本,请自行小规模尝试后大批量实验,产品售后仅限产品本身,无其他任何连带责任,请须知。
本产品仅供研究使用,不适用于临床诊断或治疗。